引物的作用原理?

符宇锋符宇锋最佳答案最佳答案

引物(Primer),是一类长度为15~30碱基对的小分子单链核苷酸片段 。其功能在于识别特定的DNA序列并引导起始DNA复制过程。在细胞内,许多基因的拷贝被聚集在一起形成聚合酶链反应(PCR)。通过引入外源的合成引物,每个基因的多个拷贝可以被分别地激活,而每个激活的拷贝可以沿着基因组连续复制多遍,从而使得被检测的基因得到倍增。最后,通过测序这些引出的单体链可以知道该基因所编码的蛋白质序列。引物是基因克隆和基因测序必不可少的关键因素。 在细菌等原核生物中,由于存在复制起点,引物不需要与启动子上游的正序序列特异性结合就可以诱导DNA复制。然而,在真核生物如人类细胞中,情况要复杂得多。

大多数情况下,需要引物的5’末端的核苷酸序列与特异染色体的基因启动子区域(有内含子和外显子的剪接位点)有一致性,才能引起基因转录。目前发现的与引物作用有关的蛋白主要有两种,即POLR2A和SPTLC2. POLR2A是一种核糖核蛋白,参与引物的合成及早期DNA复制。SPTLC2属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族,能够使引物末端磷酸化,进而作为起始复合物的组成部分引发DNA复制。

除了上述两类直接与引物作用相关的因子外,还有许多其他蛋白可能与引物的合成或增强有关。这些相关因子主要包括组蛋白去乙酰化酶、DNA拓扑异构酶IⅡI、DNA修复蛋白KU60和MG53等等。

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